发布时间:2022-03-21 浏览次数: 次
可变剪接是调节基因表达和产生蛋白质多样性的重要机制,是导致真核生物基因和蛋白质数量较大差异的重要原因,Pre-mRNA剪接是真核生物基因表达的关键步骤,其剪接异常直接影响蛋白的结构和功能。随着新一代测序技术的发展,大量的潜在致病变异被发现,根据文献报道,大约1/3的致病变异会导致pre-mRNA剪接异常,且大部分致病变异的临床意义是未知的。
Minigene技术是一种研究基因变异对可变剪接影响的体外功能验证技术。该技术通过将带有变异基因的外显子片段的质粒载体转染细胞后,利用RT-PCR及Sanger测序检测异常mRNA产物,进而分析基因变异对pre-mRNA可变剪接的影响(如内含子保留和外显子切除)。
如下图,是我司构建的某基因的空载体/WT/MUT,可明显看到MUT剪切异常PCR产物变大
这种是比较理想的实验结果,经过多种minigene项目的经验,我司有处理复杂实验的经验。欢迎留言,询价
项目周期:3-4周
客户提供:基因信息及 突变的位点
结果交付:
(1)构建的载体;
(2)实验报告:包括实验步骤,引物序列,测序峰图,结果图片和分析结果